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磁珠法提取和柱式提取有哪些區(qū)別？

磁珠法提取和柱式提取是兩種常用的生物分子分離和純化技術(shù)，他們有哪些區(qū)別呢？一、原理磁珠法提取原理：利用磁性顆粒（磁珠）與目標(biāo)分子的特異性結(jié)合，通過(guò)磁場(chǎng)分離磁珠和非目標(biāo)物質(zhì)。柱式提取原理：利用離心力或真空抽吸，通過(guò)填充有特定介質(zhì)（如硅膠或離子交換樹(shù)脂）的柱子，分離和純化目標(biāo)分子。二、操作方式磁珠法提取操作方式：將樣品與磁珠混合，使目標(biāo)分子與磁珠表面的功能性分子結(jié)合。通過(guò)磁場(chǎng)作用使磁珠沉降或吸附到管壁上，去除上清液后進(jìn)行洗滌和洗脫。柱式提取操作方式：將樣品加載到柱子上，目標(biāo)分子與...

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原代細(xì)胞、細(xì)胞系和細(xì)胞株如何區(qū)分？

在細(xì)胞和基因治療的時(shí)代，細(xì)胞成為基礎(chǔ)。在商業(yè)的細(xì)胞時(shí)代，常有原代細(xì)胞、細(xì)胞系和細(xì)胞株，那這些原代細(xì)胞、細(xì)胞系和細(xì)胞株如何區(qū)分呢？它們都有什么作用呢？一、原代細(xì)胞原代細(xì)胞指的是直接從組織或器官中分離并初次培養(yǎng)的細(xì)胞。它們的傳代次數(shù)有限，通常只能傳代幾次到十幾次。原代細(xì)胞保持了體內(nèi)細(xì)胞的許多原始特性，因此非常適合用來(lái)研究細(xì)胞的基本功能和生理反應(yīng)。原代細(xì)胞的作用主要體現(xiàn)在在疾病模型建立、藥物篩選和毒性測(cè)試等領(lǐng)域。二、細(xì)胞系細(xì)胞系則是由原代細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)而成的細(xì)胞群體。與原代細(xì)...

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細(xì)胞污染預(yù)防的種類(lèi)和方法

細(xì)胞污染在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，非常常見(jiàn)。目前為止，防止細(xì)胞污染的首要手段是預(yù)防。細(xì)胞污染通常會(huì)出現(xiàn)在生物安全柜和培養(yǎng)箱這兩個(gè)地方，因此，如何做好這兩個(gè)地方的預(yù)防措施呢？一、所有進(jìn)入安全柜的東西都要盡可能保證無(wú)菌直接購(gòu)買(mǎi)商用試劑和耗材是穩(wěn)定的方式，如Gibco、中科百抗的血清，Corning的耗材等，這些品牌的試劑和耗材一般只要是正品都可以保證無(wú)菌。若自己配制的試劑，那么在配制中需要嚴(yán)格按無(wú)菌操作進(jìn)行。二、分裝的試劑建議過(guò)濾一次試劑在分裝時(shí)可以考慮再用針頭式過(guò)濾器過(guò)濾一次，減少污染...

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細(xì)胞培養(yǎng)常用抗生素

抗生素在細(xì)胞培養(yǎng)中的使用可以最大限度地降低污染，從而降低細(xì)胞、試劑的費(fèi)用損失和時(shí)間損失。因此，細(xì)胞培養(yǎng)常用抗生素有哪些呢？一、嘌呤霉素鹽酸鹽Puromycin,Dihydrochloride嘌呤霉素(Puromycin)是一種氨基糖苷類(lèi)抗生素，能有效抑制革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)，還能抑制原生生物、藻類(lèi)、哺乳動(dòng)物和昆蟲(chóng)細(xì)胞的生長(zhǎng)，一般2天內(nèi)能殺死99%的細(xì)胞。二、鹽酸萬(wàn)古霉素VancomycinHydrochloride鹽酸萬(wàn)古霉素(Vancomycinhydrochloride)是一...

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分子實(shí)驗(yàn)中DNA連接酶的作用機(jī)制

DNA連接酶(DNAligases)是一類(lèi)重要的酶，在DNA復(fù)制、修復(fù)和重組過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。一、ATP依賴(lài)性連接在真核生物的連接酶如DNA連接酶I中，連接反應(yīng)是ATP依賴(lài)性的。ATP的水解驅(qū)動(dòng)了DNA鏈的連接。連接反應(yīng)主要發(fā)生在DNA雙鏈斷裂的末端。T4DNA連接酶是典型的ATP依賴(lài)性連接：（1）原理與特點(diǎn)：T4DNA連接酶是一種來(lái)自噬菌體T4的連接酶，其主要原理是在DNA鏈斷裂的末端引入磷酸二酯鍵，將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)。它需要ATP作為輔助能量。（2）優(yōu)點(diǎn)：T4DN...

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